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英文簡稱
規(guī)格
貨號
beas-2b:beas2b
1×106
P-X662
產(chǎn)品詳情:
細胞別稱:Beas-2B; BEAS 2B; BEAS2B; Beas2B; Bronchial Epithelium transformed
with Ad12-SV40 2B;人支氣管上皮樣細胞;人支氣管上皮樣細胞
種屬來源:人
年齡性別:
組織來源:肺;支氣管;正常;上皮;病毒轉(zhuǎn)化
生長特性:貼壁生長
細胞形態(tài):上皮細胞樣
背景簡介:BEAS-2B細胞是從一位非癌個體的正常人支氣管上皮病理切片分離出的上皮細胞。這些細胞用腺病毒12-SV40病毒雜交病毒感染并克隆,BEAS-2B細胞保留了對血清反應進行鱗關(guān)分化的能力,并有用于篩選誘導或影響分化及致癌的化學或生物制劑。BEAS-2B細胞角蛋白及SV40抗原染色陽性。
生物等級:2
細胞規(guī)格:1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測:無
基因表達情況:
保藏機構(gòu):ATCC; CRL-9609 ECACC; 95102433
培養(yǎng)基:90%MEM+10%FBS+PS
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件:無血清凍存液,液氮儲存
倍增時間:
STR鑒定位點Amelogenin:X, Y;D8S1179:13, 15;D21S1128, 30;D7S820:10, 13;CSF1PO:9, 12;D3S1358:15, 17;TH01:7, 9.3;D13S317:13;D16S539:12;D2S1338:22, 23;D19S433:13.2, 15.2;vWA:17, 18;THOX:6, 11;D18S51:18, 19;D5S818:12, 13;FGA:20, 24。
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理:
1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備DMEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二.細胞處理:
1)凍存細胞的復蘇::將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜
。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:1、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例:
1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
實驗原理:
實驗步驟:
1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上,利用293T細胞進行慢病毒包裝,獲得含目的基因的慢病毒;
2 轉(zhuǎn)染前24 h進行細胞鋪板,轉(zhuǎn)染時細胞密度控制在80%左右;
3 天加入適量病毒懸液感染細胞,并置于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育;
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基,并繼續(xù)培養(yǎng);
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng),直至顯微鏡下觀察熒光細胞比例為100%,獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系。
公司正在出售的產(chǎn)品:
IL-2誘導型T細胞激酶抗體 |
胰島細胞自身抗原1抗體 |
ITK |
小鼠CD83分子(CD83)elisa檢測試劑盒 |
脂肪細胞膜相關(guān)蛋白抗體 |
AFF4 |
APMAP |
細胞相關(guān)AF4樣蛋白抗體 |
體外加帽RNA轉(zhuǎn)錄合成試劑盒 |
ICA1 |
AKT蛋白共沉淀分析試劑盒 |
PHC1 |
脫氫抗壞血酸(DHA)含量測試盒 |
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體 |
早期發(fā)育調(diào)控蛋白1/EDR1抗體 |
CCDC28A |
PE-CY5標記的驢抗豚鼠IgG H&L |
甲狀腺反應蛋白抗體 Anti-THRSP |
Donkey Anti-Guinea Pig IgG H&L / PE-Cy5 |
三磷酸腺苷受體P2X6抗體 Anti-P2RX6 |
微管聚合促進蛋白3抗體 |
原鈣粘蛋白12抗體 Anti-PCDHA12 |
TPPP3 |
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SRPK1抗體 Anti-SRPK1 |
人11-脫氧皮質(zhì)醇elisa分析檢測試劑盒 |
小鼠降鈣素(CT)elisa分析檢測試劑盒 |
Human11-DeoxycortisolELISAKit |
beas-2b人支氣管上皮細胞CTELISAKit |
大鼠26S蛋白酶體(26S PSM)elisa分析檢測試劑盒 |
人鈣調(diào)磷酸酶(CaN)elisa分析檢測試劑盒 |
26S PSM ELISA Kit |
CaNELISAKit |